|
NONOBSTRÜKTİF AZOOSPERMİDE
AKIM SİTOMETRİSİ İLE SEMİNAL HAPLOİD HÜCRE ARANMASI:
TESE İÇİN İYİ BİR PREDİKTİF PARAMETRE
Testislerden
sperm eldesi (TESE) nonobstrüktif azoospermik (NOA)
hastalarda çocuk sahibi olma şansı vermiştir. TESE ile
sperm elde etme oranları ortalama %50 civarında olmakla
birlikte, sperm bulma şansını önceden tahmin ettirmede
günümüzde kullanılan noninvaziv yöntemler yeterli değildir.
Bu çalışmada, akım sitometri (flow cytometry-FCM)
yöntemi ile seminal haploid hücrelerin saptanarak
gereksiz testis biyopsisi yapılmasından kaçınılması
amaçlanmıştır. FCM yönteminde floresan ile boyandıktan
sonra hücrenin içeriği analiz edilir. Floresan sinyallerinin
yoğunluğuna bakılarak DNA içeriği ve kondensasyonu değerlendirilir.
Semen hücresinde ise, FCM ile hücrenin büyüklüğü, sitoplazmanın
granüler yapısı ve floresan sinyalinin yoğunluğuna göre
haploid olup olmadığı saptanabilir. Günümüzde insanda
seminal hücrelerin ayırt edilmesinde ve spermatogenez
bozukluklarının saptanmasında FCM kullanılmaktadır.
Bu çalışmada
testis biyopsisi yapılan 37 NOA olguda testis volümleri,
serum FSH ve inhibin B ölçümleri, seminal sitoloji,
seminal FCM analizi ve histolojik incelemeler gerçekleştirilmiştir.
Azoospermik semen örneklerinin yayma preparatları Harris-Shorr
tekniği ile boyanarak tesbit edilmiş ve preparatlar
spermatid varlığı açısından incelenmişlerdir. Birkaç
hafta sonra aynı hastalardan tekrar semen örnekleri
alınarak bu sefer FCM ile analiz edildiler. Burada,
semen pelleti içindeki yuvarlak hücreler Cytofix-Cytoperm/Cytowash
kitTM ile ayrıştırılmış ve fikse edilmiştir. Arkasından
FCM ile incelemeye alındılar. Aynı işlemler kontrol
semenlerde de yapıldı.
Sonuçta,
18 biyopside sperm bulundu. Sitoloji, FCM analizi ve
histolojik bulgular karşılaştırıldığında FCM'nin sitolojiden
daha sensitif (%100'e karşılık %59) ama daha az spesifik
(%67'ye karşılık %83.5) olduğu, komplet spermatogenez
bulunması durumunda ise sensitivitenin düşerek (%50),
daha spesifik (%100) hale geldiği gözlemlendi. Sonuçlar
aşağıdaki tabloda özetlenmiştir.
Tablo. Testiculer sperm eldesi
(TESE) sonuçları ile FCM ve histolojik inceleme sonuçlarının
karşılaştırılması.

Mevcut
veriler TESE sonuçlarını önceden tahmin etmede ve NOA
olgularının tedavilerinde yüz güldürücü sonuçlar alınmasında
FCM ile semende haploid hücre aranmasının noninvaziv
ilginç bir yöntem olduğunu ortaya koymaktadır. Ancak
daha ucuz ve kolay olması nedeniyle azoospermik semen
örneğinin önce yayılarak boyanmış preparatının incelenmesi,
eğer spermatid görülürse TESE'ye geçilmesi, görülmezse
FCM ile bir kez daha analiz edilmesi uygun görülmektedir.
Human
Reproduction 2005 20(7):1915-1920'den tercüme edilmiştir.
|